Implication Des Microarn Dans L’hypersécrétion

**Implication des microARN dans l’hypersécrétion de catécholamines d’une tumeur neuroendocrine, le phéochromocytome**:

- Réf **ABG-125563**
- Sujet de Thèse- 28/08/2024- Contrat doctoral- L'UNIVERSITE DE ROUEN-NORMANDIE- Lieu de travail- Mont-Saint-Aignan - Normandie - France- Intitulé du sujet- Implication des microARN dans l’hypersécrétion de catécholamines d’une tumeur neuroendocrine, le phéochromocytome- Champs scientifiques- Biologie
- Santé, médecine humaine, vétérinaire
- Mots clés- microARN, exocytose, tumeur neuroendocrine, phéochromocytome, catécholamines**Description du sujet**:
**Contexte**: Les phéochromocytomes (PCC) sont des tumeurs neuroendocrines rares de la glande médullosurrénale qui sécrètent des taux élevés de catécholamines telles que l'adrénaline et la noradrénaline. Ces tumeurs provoquent de nombreux effets délétères chez les patients, notamment une hypertension difficile à contrôler et parfois fatale. Cette sécrétion excessive, observée dans la majorité des PCC, n'est pas seulement le résultat d'un effet de masse tumorale mais aussi celui d'un défaut de contrôle de la voie de sécrétion régulée par le calcium (RSP). Les mécanismes sous-jacents à cette hypersécrétion ne sont pas bien compris. Nous avons donc émis l'hypothèse que la dérégulation de l'expression des microARNs (miARNs) pourrait être à l'origine de cette hypersécrétion. En effet, les miARNs sont de petits ARNs régulateurs non codants qui agissent au niveau post-transcriptionnel en se liant à leurs ARNm cibles. Par la régulation négative qu'ils exercent sur leurs cibles, ils contrôlent un grand nombre de processus cellulaires.

**Travaux antérieurs** : Afin d'avoir une compréhension plus globale de l'impact des miARN dans le contrôle de l’exocytose, nous avons récemment développé une stratégie bioinformatique basée sur des données transcriptomiques de PCC. Ceci nous a permis d'identifier un réseau d'interaction miARN:ARNm centré sur la RSP dans lequel 34 miARN et 48 gènes sont significativement dérégulés dans les PCC par rapport à la glande surrénale normale. Il apparaît que 20 de ces miARNs régulent efficacement la RSP dans des conditions stimulées et/ou non stimulées, en utilisant un test de sécrétion luminescent sensible et rapide que nous avons développé dans des cellules PC12. Des ARNm cibles ont été confirmés par RT-qPCR à haut débit et western-blot. Ces résultats nous fournissent le premier interactome miARN:ARNm impliqué dans la dérégulation de l'exocytose dans le PCC et nous permettent d'identifier de nouvelles cibles moléculaires dans les tumeurs neuroendocrines.

**Objectifs**: Sur la base de ces résultats, l'objectif principal de ce projet de thèse est d'identifier et de caractériser fonctionnellement les miARN impliqués dans l’hypersécrétion afin d'ouvrir de nouvelles perspectives thérapeutiques pour les patients atteints de PCC. Le premier objectif est donc d'évaluer l'intérêt de ces miARNs directement sur des cultures primaires de PCC humains que nous obtiendrons grâce à une collaboration avec le service d'endocrinologie du CHU de Rouen. Cette approche, qui utilisera la microscopie à ondes évanescentes (TIRF), sera d'abord développée sur des lignées cellulaires issues de PCC et sur des cultures primaires de cellules chromaffines bovines. Le second objectif est d'évaluer l'impact de ces miARN sur le profil hémodynamique de souris porteuses d'allogreffes de PCC à l’aide d’un système lentiviral inductible de miARN. Ce projet est, à notre connaissance, le premier à identifier, évaluer et comprendre le rôle des miARN dans la sécrétion excessive de catécholamines qui est caractéristique des tumeurs neuroendocrines et des PCC en particulier. Ces miARN pourraient également constituer une nouvelle classe de cibles thérapeutiques pour la prise en charge des patients atteints de tumeurs neuroendocrines qui sécrètent des niveaux élevés d'hormones.

**Prise de fonction**:

- 28/10/2024**Nature du financement**:

- Contrat doctoral**Précisions sur le financement**:

- Ligue Contre le Cancer - Région Normandie**Présentation établissement et labo d'accueil**:

- L'UNIVERSITE DE ROUEN-NORMANDIEInserm U1239 - NorDiC (Différenciation et Communication Neuroendocrine, Endocrine et Germinale).

**Site web**:
**Intitulé du doctorat**:

- Biologie**Pays d'obtention du doctorat**:

- France**Etablissement délivrant le doctorat**:

- Normandie Université (Comue)**Ecole doctorale**:

- Normande de biologie intégrative, santé, environnement**Diplôme**: Master 2 en biologie avec spécialité en Physiologie, (Neuro)Endocrinologie, Cancérologie, Biologie Cellulaire/Moléculaire

**Approches techniques et méthodologiques**:

- Biologie cellulaire (primaire et lignées) et moléculaire (RT-qPCR, WB, clonage, transfection, rapporteur )
- Techniques d’acquisition et d’analyse d’