Contrôle de La Qualité Des Protéines Associées Au Fuseau Mitotique

**Contrôle de la qualité des protéines associées au fuseau mitotique // Quality control of spindle-associated proteins**:

- Réf **ABG-130880**
**ADUM-64641**
- Sujet de Thèse
- 11/04/2025
- Contrat doctoral
- Université de Montpellier
- Lieu de travail- Montpellier cedex 5 - France
- Intitulé du sujet- Contrôle de la qualité des protéines associées au fuseau mitotique // Quality control of spindle-associated proteins
- Mots clés- Quality control, SUMO, ubiquitin, division cellulaire, ségrégation des chromosomes, mitotic spindle
Quality control, SUMO, ubiquitin, cell division, chromosome segregation, fuseau mitotique

**Description du sujet**:

- Les voies de contrôle de la qualité des protéines (PQC) garantissent la progression correcte des processus cellulaires en détectant et en éliminant les protéines dysfonctionnelles issues de mutations ou de stress cellulaires. Cependant, il est surprenant de constater que l'on sait très peu de choses sur les mécanismes moléculaires impliqués dans le contrôle de la qualité des protéines du fuseau pendant la mitose, malgré leur importance pour la stabilité du génome.
Nous avons la preuve qu'un stress aigu active une voie cellulaire de PQC qui préserve la fonction du fuseau. Nous proposons donc d'utiliser une méthodologie très diversifiée pour étudier en profondeur l'agrégation des protéines du fuseau dans des conditions de stress et révéler les détails moléculaires de la voie PQC qui assure l'intégrité du fuseau mitotique chez la levure. En outre, nous visons à identifier les voies de PQC du fuseau qui sont hautement conservées entre la levure et les cellules de mammifères, ainsi que de nouveaux mécanismes de PQC spécifiques aux mammifères.
Notre approche comprend la biologie cellulaire et la génétique classiques de la levure, la biochimie et la protéomique basée sur la spectrométrie de masse quantitative. Ces techniques seront combinées à un contrôle rapide, réversible et précis de la température, à la résolution d'une seule cellule ou d'une sous-cellule, associé à l'imagerie de cellules fluorescentes en direct. En outre, nous utiliserons de nouveaux essais de complémentation de fragments de protéines basés sur la luciférase pour détecter les interactions protéine-protéine et quantifier les modifications transitoires des protéines.
Le projet étudie les mécanismes cellulaires fondamentaux PQC inexplorés qui signalent et contrôlent l'homéostasie des protéines, assurant l'intégrité du cytosquelette pendant la croissance, la division et le vieillissement des cellules. L'utilisation de technologies quantitatives est nouvelle pour ce type d'études.

Protein Quality Control (PQC) pathways guarantee correct progression of cellular processes by detecting and eliminating dysfunctional proteins that arise through mutations or cellular stress. Surprisingly however, very little is known on the molecular mechanisms that are involved in PQC of spindle proteins during mitosis, despite their importance for genome stability.
We have evidence that acute stress activates a cellular PQC pathway that preserves spindle function. We thus propose to make use of a highly diverse methodology, to first study aggregation of spindle proteins under stress conditions in depth and reveal the molecular details of the PQC pathway that ensures mitotic spindle integrity in yeast. In addition, we aim to identify which spindle PQC pathways are highly conserved between yeast and mammalian cells as well as new, mammalian-specific PQC mechanisms.
Our approach includes classical yeast cell biology and genetics, biochemistry and quantitative mass spectrometry-based proteomics. These techniques will be combined with recently developed state-of-the art fast, reversible and precise temperature control, in single cell or subcellular resolution, combined with live fluorescent cell imaging. Moreover, we will use novel luciferase-based protein-fragment complementation assays to detect protein-protein interactions and quantify transient protein modifications.
The project investigates unexplored PQC basic cellular mechanisms that signal and monitor protein homeostasis, ensuring cytoskeleton integrity during cell growth, division and ageing. The use of quantitative technologies is novel for this type of studies.

Début de la thèse : 01/10/2025

**Nature du financement**:

- Contrat doctoral

**Précisions sur le financement**:

- Concours pour un contrat doctoral

**Présentation établissement et labo d'accueil**:

- Université de Montpellier

**Etablissement délivrant le doctorat**:

- Université de Montpellier

**Ecole doctorale**:

- 168 Sciences Chimiques et Biologiques pour la Santé
- Formation en biochimie, biologie cellulaire, biologie moléculaire, microscopie - Bon niveau d'anglais - Enthousiasme et créativité
- Background in biochemistry, cell biology, molecular biology, microscopy - Correct level in English - Enthusiasm and creativity- 12/05/2025